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發酵罐滅菌的詳細操作規程說明書

  • 來源:video-learn.net 網站編輯:廣世生物 發表時間:2022-04-06 15:51

 

發酵罐操滅菌作前請認真檢查冷水機、空壓機、反應器、進出水管、氣管情況。填好使用說明書。
開機:先打開其他單元上的開關,再打開主機背后的開關。
關機:先把控制器上所有單元的參數狀態調到off,把進氣開關打開后關機;關機時先
關控制器后面的開關,再關其他單元上的開關。
 
發酵罐滅菌操作
1、取下馬達,平放于桌上。罐頂端套上黑色保護帽。 
2、由罐上取下溫度傳感器,該傳感器不需要滅菌。 
3、取下PH電纜線,蓋上紅色保護帽;將PH電極要插到底。務必擰緊電極的上下兩個固定螺帽。PH電極滅菌前要標定。PH電極標定:接好電纜后擰開電極的固定螺帽(第一個),將PH電極取出后用去離子水沖洗干凈后,輕輕用面紙吸干上面的水后先放入標準溶液4.01中校正,等控制器上數據穩定后在 set zero處輸入4.01(不管實際數值的微弱差別);輸入完閉后從標準液中取出電極,沖洗、吸干后放入7.00的標準溶液中,等控制器上數據穩定后在set span處輸入7.00(不管實際數值的微弱差別)。PH電極校正后不要關控制器。 
4、取下DO電纜線,DO電纜接口處用錫箔紙包好后套上黑色帽。DO電極滅菌完后標定。DO電極要插到底,擰緊電極的上下兩個固定螺帽。滅菌前要注意溶氧電極里頭的保護液是否還有,沒有則要進行添加。 
5、取下消泡或液位電纜線,將消泡或液位電纜插到底,滅菌后定位到所需要的高度后就不要再壓下去。消泡電極的高度離液面約1.5cm處。 
6、拆下發酵罐上和冷凝器上的進、出水管,拆下的同時要用夾子夾住拆下水管的接頭處,以防水流出。 
7、發酵罐上的過濾器的兩端多要用夾子夾死,過濾器的出口處用錫箔包好,所有過濾器的兩端多要用夾子夾住。發酵完畢倒罐后注意檢查過濾器是否被打濕,若有則趕快用吸球將其中的液體吹出。 
8 、用鐵夾夾死收獲管上的硅膠管以防在滅菌鍋內跑液。收獲管不用時上面一定要卡死不移走。 
9、在滅菌前.將發酵罐的六個固定螺帽擰松出氣,其他螺帽一定要擰緊!滅菌完后打開高壓鍋后立刻將其擰緊,注意戴上手套防止被燙傷。 
10、酸不要放高壓鍋內滅菌,將空的酸液瓶上的過濾器用錫箔包好,并將瓶蓋擰松出汽。滅菌完后去掉錫箔過濾器上的錫箔紙作為出汽口。(注意與酸瓶相連的硅膠管不要卡死);堿液瓶和硅膠管可以一起滅菌(與堿液瓶相連的硅膠管要卡死)。 
11、取下電熱夾套將其平鋪于桌面。 
12、滅菌前調整好攪拌葉的位置,底下的攪拌葉盡量靠近空氣分布器,上面的一個位置調整到所加發酵液的中間位置。
13、取樣器的位置不要靠近擋板的位置,盡量靠中間位置。
14、滅菌前將取樣器的吸球取下。所有的硅膠管不要靠到高壓鍋的內壁上。
 
發酵罐滅菌完畢后
1、將六個松開的固定螺帽和酸堿瓶蓋擰緊。
2、去掉包在過濾器上的錫箔紙和卡硅膠管的夾子。
3、裝上馬達,若馬達內側潤滑油干了,涂上適量的凡士林。
4、接上溶氧電纜線后進行DO電極標定:滅菌完后接上DO電極的電纜線后在set zero處輸入0;將反應器的空氣流量控制在1L/min,Agitation調到100r/min過夜,早上開在set span處輸入100后按確認鍵。
5、等溫度降到發酵所需溫度時接好各進出水管、PH電纜線,消泡電纜線。
6、在放入溫度電極之前,先往溫度電極的進口里滴加甘油,插入電極后繼續滴加到冒出止。注意溫度電極要插到底。
7、.檢查空壓機的輸出壓力,應在0.7~1.0kg/cm3 范圍內。
8、消泡劑的硅膠管要按從下往上順序在泵上安裝。
 
冷水機工作溫度的設定
開機:接好進出水管→打開總電源→進行溫度設計→打開循環泵→開始制冷
關機:先關制冷開關→關循環泵開關→同時將進、出水口閥門關閉→關上電源
溫度設定:開機→面板顯示“PP0.0” →按“移位鍵”和“調整鍵”后顯示“PP0.1”
→按SET鍵確認→此時面板顯示上限值,按“移位鍵”和“調整鍵”設定上限值→按SET鍵確認→此時面板顯示下限值,按“移位鍵”和“調整鍵”設定下限值→按SET鍵確認→再按SET鍵→再按SET鍵→面板顯示結束標志“---”,按SET鍵回到測量顯示,設置結束。
 
上述操作結束后準備接種
發酵罐接種準備:準備好鐵擋板、打火機、酒精噴壺、接種圈、裝95%乙醇的搪瓷缸容器、尖頭鉗子、活動扳手,接種瓶。
接種操作
1、移開接種口附近的膠管,將鐵擋板圍住接種口后用酒精噴壺朝接種口處噴酒精后點著,(注意:如果有火焰順著酒精溢出鐵板外,則需要吹滅鐵板兩側溢出的火焰。)
2、將接種圈沾酒精點著后套住接種口處,將扳手或鉗子沾酒精后擰開螺帽后用鉗子將其夾住拿出,吹滅螺帽和鉗子上的火焰后迅速放入裝95%乙醇的搪瓷缸容器里。
3、將接種瓶在火焰處拔開后迅速倒入發酵罐內。完畢后用鉗子夾出螺帽擰上。整個過程確保無菌操作!
 
發酵罐溶氧設定:發酵模式下溶氧的控制由有四種情況:按off鍵→按control鍵→ 按Auto鍵→setup→cascade→選擇以下四種模式。
1、None狀態:溶氧的控制主要通過增加空氣流量和設定好固定的轉速來控制。
2、Agit狀態:溶氧的控制主要通過提高轉速來控制,此狀態在空氣流量保持不變的情況下溶氧隨著細胞消耗降低時通過增加轉速來提高溶氧水平。直到轉速達到設訂的轉速上限值為止。該過程為自動控制。
3、02 狀態:該狀態主要通過控制氧氣與空氣的混合百分比來控制。溶氧隨著氧氣百分比的增加而增加。為自動控制過程。
4、Agit/ 02 狀態:該狀態中溶氧的控制先是通過提高轉速來增加的,當轉速達到設定的上限值時若實際溶氧值仍沒達到所需要的設定值,此時轉速控制在上限值,開始以從小到大的百分比自動提高氧氣的進入量,直到達到所設定的溶氧值附近為止。該過程亦為自動控制過程。
注意:在使用Agit狀態和Agit/ 02 狀態時,若實際溶氧值與設定值相差太大,則要確保所設定的攪拌轉速上限值不要太大,否則轉速會瞬間內增大帶來太大的剪切力和大量的泡沫。實際操作中可以同時通過空氣流量計的手動控制來輔助操作。
按off鍵→按control鍵→ 按Auto鍵→setup→此時界面中出現的P Gain和 l Gain為兩個出廠設定好的參數,不要改動。

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